Ürünler

Diğer pozitif sarmallı RNA virüslerine benzer şekilde tombus virüsleri, zara bağlı viral replikaz kompleksi (VRC) tarafından çoğaltılır.VRC, p92 virüs kodlu RNA'ya bağımlı RNA polimeraz (RdRp), viral p33 RNA şaperonu ve birkaç birlikte seçilmiş konak proteininden oluşur.Çevirisinden sonra işlevsel bir RdRp haline gelmesi için, p92 replikasyon proteininin VRC'ye dahil edilmesi ve ardından aktivasyonunun yapılması gerekir.Daha önce hücresiz maya ekstraktı bazlı bir tahlilde Domates çalı dublör virüsü (TBSV) RdRp'nin aktivasyonunun çözünebilir bir konakçı faktör(ler) gerektirdiğini göstermiştik.Bu makalede, hücresel ısı şoku proteini 70'i (Hsp70), N-terminal olarak kesilmiş bir rekombinant TBSV RdRp'nin aktivasyonu için gerekli olan birlikte seçilmiş konak faktörü olarak tanımlıyoruz.Ek olarak, Hsp70 fonksiyonunun küçük molekül bazlı bloke edilmesi, in vitro olarak tombusvirüs RdRp tarafından RNA sentezini inhibe eder.Ayrıca, nötr fosfolipitlerin, yani fosfatidiletanolamin (PE) ve fosfatidilkolin (PC), in vitro RdRp aktivasyonunu arttırdığını gösterdik.Aksine, fosfatidilgliserol (PG), in vitro RdRp aktivasyonu üzerinde güçlü ve baskın bir inhibitör etki gösterir.Ayrıca PE ve PC'nin RdRp-viral artı-sarmallı RNA [(+)RNA] etkileşimini uyardığını, PG'nin ise viral RNA'nın RdRp'ye bağlanmasını engellediğini gösterdik.Tombusvirüs RdRp aktivasyonunda çeşitli fosfolipidlerin uyarıcı ve inhibe edici rollerine dayanarak, hedeflenen hücre altı zarlarının lipid bileşiminin, enfeksiyon sırasında yeni VRC düzeneğini düzenlemek için tombusvirüsler tarafından kullanılabileceğini öneriyoruz. Virüs kodlu RNA'ya bağımlı RNA polimeraz Birkaç pozitif sarmallı RNA virüsünün enfekte olmuş hücrelerinde viral RNA soyunun sentezlenmesinden sorumlu olan (RdRp) başlangıçta etkin değildir.Bu stratejinin, sitozolde hızla RNA ile tetiklenen hücresel antiviral tepkilerin indüklenmesine yol açacak viral RNA sentezini önlemesi muhtemeldir.Zara bağlı replikaz kompleksinin montajı sırasında, viral RdRp, RdRp'yi RNA sentezi yeteneğine sahip kılan tam olarak anlaşılmayan bir süreçle aktive olur.TBSV RdRp kullanarak, birlikte seçilmiş hücresel Hsp70 şaperon ve nötr fosfolipitlerin in vitro RdRp aktivasyonunu kolaylaştırdığını gösterdik.Buna karşılık, fosfatidilgliserol (PG), in vitro RdRp aktivasyonu ve RdRp-viral RNA etkileşimi üzerinde baskın bir inhibitör etkiye sahiptir; bu, RdRp'yi çevreleyen membranöz mikro alanın, RdRp'nin RNA sentezi yeteneğini büyük ölçüde etkilediğini düşündürür.Bu nedenle, viral RdRp'nin aktivasyonu, muhtemelen enfekte olmuş hücrelerde birden fazla konak bileşenine bağlıdır.