ONPG CAS:369-07-3 %98.0 Min. Beyazdan Kırık Beyaza Toz
Katalog numarası | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
Ürün adı | ONPG(2-Nitrofenil-beta-D-galaktopiranosid) |
Moleküler formül | C12H15NO8 |
Moleküler ağırlık | 301.25 |
Depolama Ayrıntıları | 2 ila 8 °C |
Uyumlaştırılmış Tarife Kodu | 29400000 |
Ürün özellikleri
Saflık (HPLC) | dak.%98.0 |
Dış görünüş | Beyazdan kirli beyaza toz |
Çözüm(Suda %1) | Berrak, renksiz ila hafif sarı çözelti |
Su içeriği(Karl Fisher) | Maks.%0,5 |
Spesifik optik dönüş [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 °C ila -73,0 °C |
ONPG testi (β-galaktosidaz testi) hakkında tartışma
Son zamanlarda sıkça sorulan sorular: 1. ONPG testi gecikmiş laktoz fermantasyonunu ayırt etmek için neden kullanılabilir?2. Ulusal standart, ONPG testi için neden %3 sodyum klorür trisakarit demir (veya trisakarit demir) kullanılması gerektiğini belirtiyor?3. Vibrio parahaemolyticus için OPNG testi yapılırken standarda göre neden damla damla toluen eklenmelidir?işlev nedir?
Şirketimiz bir çok bilgiyi incelemiş, özetlemiş ve aşağıda sizlerle paylaşmıştır:
İlke: ONPG'nin Çince adı o-nitrobenzen-β-D-galaktopiranosiddir.ONPG, β-galaktosidaz tarafından galaktoza ve sarı o-nitrofenole (ONP) hidrolize edilebilir, bu nedenle β-galaktosidaz aktivitesi, kültür ortamının renk değişimi ile tespit edilebilir.
Laktoz, çoğu mikroorganizmanın tespit etmesi gereken bir şekerdir.Metabolizması iki enzim gerektirir, biri hücre permeazıdır, laktoz hücrelere permeazın etkisi altında girer;diğeri laktozu galaktoza hidrolize eden β-galaktosidazdır.Laktoz ve glikoz.β-Galaktosidaz ayrıca doğrudan ONPG üzerinde etki ederek onu galaktoz ve sarı o-nitrofenole (ONP) hidrolize edebilir.Laktoz gecikmeli fermenterlerde bile 24 saatte yapılabilir.Bu nedenle, kültür 1'in agar slantından alınması ve 36°C'de 1-3 saat ve 24 saat tam daire içinde inoküle edilmesinin gözlem sonuçlarını açıklar.β-galaktosidaz üretilirse 1-3 saatte sararır, böyle bir enzim yoksa 24 saatte renk değiştirmez.
Yukarıdaki iki enzime göre, mikroorganizmalar aşağıdaki kategorilere ayrılabilir:
1 laktozu fermente eden (18-24 saat) bakteri, permeaz ve β-galaktosidaz P + G + ile;
2 Gecikmeli laktoz fermenterleri (24 saatten uzun süren), permeaz içermeyen ancak galaktosidaz içeren: P- G+.
3 Hem permeaz hem de galaktosidaz içermeyen laktoz olmayan fermenterler: P- G-.
ONPG testi, laktozu yavaş fermente eden bakterileri (PG+) fermente etmeyen laktoz bakterilerinden (PG-) ayırt etmek için kullanılabilir, örneğin:
1 Geç laktoz fermente edenleri (P- G+) laktoz olmayan fermente edenlerden (P- G-) ayırt edin.
(a) Salmonella'dan (-) Citrobacter (+) ve Salmonella arizonae (+).
(b) Shigella sonnei'den (-) Escherichia coli (+).
ONPG testi neden %3 sodyum klorür ferrik trisakarit (demir trisakarit) üzerinde bir gece kültürü kullanılarak yapıldı?Şirketimiz bir çok bilgiye başvurdu ancak net bir açıklama yok.Yalnızca FDA web sitesinde, "Test edilecek kültürleri üçlü şekerli demir agar slantlarına inoküle edin ve 37°C'de (veya gerekirse başka bir uygun sıcaklıkta) 18 saat inkübe edin. 1.0 içeren besleyici (veya diğer) agar slantları" yazıyor. % laktoz da kullanılabilir."şu anlama gelir: test bakterileri trisakarid demir ortamına aşılandı ve 37°C'de 18 saat kültürlendi.%1 laktoz içeren besleyici agar slantları (veya diğer) ortamları da kabul edilebilir.Bu nedenle, trisakarit demir ortamının laktoz içerdiği sonucuna varılır.Bir gecelik büyümeden sonra, bakteri iyi bir aktif β-galaktosidaz üretmiştir.ONPG, bu tür bakteriler kullanılarak β-galaktosidaz tarafından daha hızlı ayrıştırılabilir.Deneysel fenomen daha hızlı ve daha iyi tezahür eder.Ek olarak, β-galaktosidazın tamamen salınması için damla damla toluen ilavesi ve 5 dakika su banyosu yapılır.