Ürünler

LecA (PA-IL), Pseudomonas aeruginosa tarafından üretilen, hidrofobik galaktositleri yüksek özgüllük ve afinite ile bağlayan sitotoksik bir lektin ve adezindir.Biyofilm hücre dışı matrisinin bir lecA-egfp translasyon füzyonu ve immünoblot analizini kullanarak, lecA'nın biyofilmle yetiştirilen hücrelerde ifade edildiğini gösteriyoruz.Hem polistiren hem de paslanmaz çelik üzerindeki statik biyofilm analizlerinde, biyofilm derinliği ve yüzey kaplaması lecA'nın mutasyonu ile azaldı ve LecA'yı aşırı üreten PAO-P47 suşunda arttı.Ana suş PAO-P47 tarafından biyofilm yüzey kaplaması, ancak çelik kuponlar üzerindeki lecA mutantı tarafından değil, izopropil-beta-D-tiyogalaktozid (IPTG) veya p-nitrofenil-alfa-D-galaktosit ( NPG).Ayrıca, bu hidrofobik galaktosidlerin yokluğunda oluşan olgun vahşi tip biyofilmler, IPTG ilavesiyle dağıtılabilir.Tersine, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lektinine yüksek afiniteye sahip olan p-nitrofenil-alfa-L-fukoz (NPF) ilavesinin biyofilm oluşumu veya dağılımı üzerinde hiçbir etkisi olmamıştır.P. aeruginosa PAO1'in planktonik büyümesi, IPTG, NPG veya NPF'nin varlığından etkilenmedi ve suş, bu şekerleri karbon kaynağı olarak kullanamadı; bu, biyofilm oluşumu üzerinde gözlemlenen etkilerin, LecA-ligandın rekabetçi inhibisyonundan kaynaklandığını düşündürür. bağlayıcı.Çelik kuponlar üzerinde dinamik akış koşulları altında büyütülen biyofilmler için de benzer sonuçlar elde edildi; bu, LecA'nın farklı çevresel koşullar altında P. aeruginosa biyofilm mimarisine katkıda bulunduğunu düşündürür.

Arabidopsis bitkilerinin yapraklarında ksiloglukan oligosakkaritlerin yan zincirinden t-fukosil tortusunu salabilen bir alfa-L-fukosidaz (EC 3.2.1.51) tespit edilmiştir.Ayrıca, benzer substrat özgüllüğüne sahip bir alfa-L-fukosidaz, SDS-PAGE üzerinde tek bir bant oluşturmak için lahana (Brassica oleracea) yapraklarından saflaştırıldı.Bu protein bandından iki peptit dizisi elde edildi ve bunlar, bizim AtFXG1 olarak adlandırmayı önerdiğimiz bir alfa-fukozidazı kodlayan bir Arabidopsis genini tanımlamak için kullanıldı.Ek olarak, bilinen alfa-L-fukosidazlarla homolojiye sahip bir Arabidopsis geni de bulundu ve biz bunu AtFUC1 olarak adlandırmayı önerdik.Hem AtFXG1 hem de ATFUC1, Pichia pastoris hücrelerinde ve kültür ortamına salgılanan alfa-L-fukosidaz aktivitelerinde heterolog olarak eksprese edildi.AtFXG1 tarafından kodlanan alfa-L-fukosidaz, ksiloglukan XXFG'den elde edilen oligosakkaritlerin yanı sıra 2'-fukosil-laktitole karşı aktifti ancak p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranosit'e karşı aktif değildi.Bununla birlikte, heterolog olarak eksprese edilen AtFUC1, yalnızca 2'-fukosil-laktitole karşı aktifti.Bu nedenle ilki, ksiloglukan metabolizması ile ilişkili olmalıdır.