Ürünler

Graves orbitopatisinin (GO) ilerlemesinde, orbital fibroblastların olgun adipositlere farklılaşması ve ardından adipoz doku birikimi gösterilmiştir.Otofaji, adipogenezde yer alır, ancak otofajinin GO'nun başlatılması ve ilerlemesindeki rolü hakkında çok az şey bilinmektedir.Bu çalışmanın amacı, GO'nun patogenezinde otofajinin rolünü araştırmaktır. GO'lu hastalardan ve normal deneklerden alınan orbital adipoz/bağ dokusu eksplantları ve ayrıca izole edilmiş orbital fibroblastlar analiz edildi.Adipogenez, hidrojen peroksit içeren veya içermeyen farklılaştırıcı ortam kullanılarak indüklendi ve otofaji, bafilomisin A1 ve Atg5 hedefli kısa saç tokası RNA (shRNA) kullanılarak manipüle edildi.Otofagozomlar elektron mikroskobu ile tanımlandı.Otofaji ile ilgili genlerin ve adipogenez ile ilgili transkripsiyon faktörlerinin ekspresyonu, gerçek zamanlı ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu ve/veya Western blot analizi ile analiz edildi.Lipit damlacık birikimi, Oil Red O boyaması ile incelendi. Otofajik vakuoller, GO hücrelerinde, GO olmayan hücrelere göre daha boldu (p<0.05).Otofaji ile ilişkili genlerin ekspresyonu, sırasıyla GO dokularında ve hücrelerinde, GO olmayan muadillerinden önemli ölçüde daha yüksekti.Interleukin-1β, GO hücrelerinde LC3-II, p62 ve Atg7 proteinini arttırdı.Otofagozom birikimi, adipogenezin 4. gününde gösterildi ve lipid damlacık oluşumu ile birlikte 10. günde azaldı.LC3 ve p62 proteinlerinin ekspresyonu, farklılaşmanın ardından 48 saat içinde arttı ve 4. günden 10. güne kadar kademeli olarak azaldı. Bafilomisin A1 tedavisi ve shRNA tarafından Atg5 yıkımı, lipit damlacık birikimini inhibe etti ve adipojenik belirteçlerin ekspresyonunu baskıladı. GO dokusunda ve hücrelerinde otofaji, kıyasla GO olmayan doku ve hücreler, otofajinin GO patogenezinde rol oynadığını düşündürür.Otofaji manipülasyonu, GO için terapötik bir hedef olabilir.