Ürünler

Serin/treonin protein fosfatazlar, birçok patojenik bakteride, fosforilasyona bağlı sinyal iletim yollarında yer alan ve sıklıkla bu organizmaların virülansı ile ilişkilendirilen temel enzimler olarak tarif edilmiştir.Mycoplasma synoviae genomunun incelenmesi, protein fosfataz 2C (PP2C) alt ailesinin farazi bir protein fosfatazını kodlayan bir genin (prpC) varlığını ortaya çıkardı.Burada, M. synoviae fosfatazın (PrpC) tam bir biyokimyasal karakterizasyonunu ve bu enzimin yapı-fonksiyon ilişkisinde metal iyonlarının özel rolünü rapor ediyoruz.PrpC amino asit dizisi analizi, çift çekirdekli metal merkezinde yer alan tüm kalıntıların ve PP2C fosfatazlarda korunan varsayılan üçüncü metal iyon koordine edici kalıntıların PrpC'de mevcut olduğunu ortaya çıkardı.PrpC, Mn(2+) iyonlarının bağımlılığı ile fosfo-substratları defosforile edebilen monomerik bir proteindir.Termal stabilite analizi, ılıman sıcaklıklarda enzim stabilitesini ve bu özellikte Mn(2+) iyonlarının etkisini göstermiştir.Kütle spektrometresi analizi, üç metal iyonunun PrpC'ye bağlandığını ve bunlardan ikisinin belirgin bir yüksek afinite sabitine sahip olduğunu öne sürdü.Varsayılan üçüncü metal koordineli artıkların, Asp122 ve Arg164'ün mutasyon analizi, bu varyantların manganez iyonlarının daha zayıf bir şekilde bağlanmasını sergilediğini ve her iki mutasyonun da PrpC fosfataz aktivitesini etkilediğini ortaya çıkardı.Bu sonuçlara göre, PrpC, holo formda gelişmiş stabiliteye sahip metale bağımlı bir protein fosfataz üyesidir ve muhtemelen katalitik aktivite için gerekli olan üçüncü metal bağlama bölgesinde yer alan Asp122'ye sahiptir.