Ürünler

Floresein ve floresein metil esterin monogalaktopiranositleri: sentez, biyotnilatlı β-galaktosidaz ile enzimatik hidroliz ve translasyonel difüzyon katsayısının belirlenmesi

Floresein monoglikozitler (d-galaktopiranosit (FMG) ve d-glukopiranozid) ve bunların metil esterleri (MFMG), asetobromoglukoz/galaktoz ve floresein metil esterden iyi verimlerle hazırlanmıştır.Galakto türevlerinin enzimatik hidroliz deneyleri (biyotinlenmiş β-galaktosidaz kullanılarak) gerçekleştirilmiş ve kinetik parametreler hesaplanmıştır.Hidroliz sırasında floresan yoğunluğunda 15-20 kat artış gözlemlenmiştir.Kısa sürede ve düşük substrat konsantrasyonunda floresanda doğrusal bir artış kaydedildi, bu da bu bileşikleri galaktosidazlar için yararlı ve hassas problar haline getirdi.MFMG için Michaelis-Menten sabiti (Km) değerinin büyüklüğü, FMG'ninkinden daha yüksektir ve bu, florojenik substratın olası bir konformasyonel değişikliğini düşündürür.FMG ile biyotinlenmiş β-Gal için Km değeri, doğal enzim için olandan daha düşüktür.Bu gözlem, doğal enzime kıyasla biyotinlenmiş enzimin daha yüksek substrat afinitesine işaret eder.Floresan korelasyon spektroskopisi kullanılarak hem florojenik substratlar hem de her iki ürün için öteleme difüzyon katsayıları ölçülmüştür.Florojenik substratlar ve enzimatik hidroliz ürünleri için öteleme difüzyon katsayılarının 3,5–4,5 × 10−10 m2 s−1 aralığında benzer olduğu ölçülmüştür.Bu nedenle, enzimatik kinetiğin, substrat ve ürünün translasyonel hareketliliğindeki farklılıktan dolayı artması veya geciktirilmesi o kadar belirgin değildir.