Ürünler

Mycobacterium tuberculosis insan konakçıda onlarca yıl kalabilir.Sırasıyla polifosfat kinaz (PPK) ve ekzopolifosfataz (PPX) tarafından sentezlenen ve hidrolize edilen inorganik polifosfatı [poli(P)] içeren sıkı yanıt yollarının, bakteri kalıcılığında önemli bir düzenleyici rol oynadığına inanılmaktadır.Burada M. tuberculosis poly(P) birikiminin geçici olarak basiller büyüme kısıtlamasıyla bağlantılı olduğunu gösteriyoruz.Ayrıca M. tuberculosis Rv1026'yı uzun zincirli poli(P)'ye karşı hidrolitik aktiviteye sahip yeni bir ekzopolifosfataz olarak tanımlıyoruz.Rv1026'nın (ppx2) ifadesini yok etmek için bir tetrasiklin ile indüklenebilir ifade sistemi kullanarak, M. tuberculosis poli(P) birikiminin yavaş büyümeye ve izoniazide karşı duyarlılığın azalmasına, ısıya ve asit pH'a karşı direncin artmasına ve hücre içi hayatta kalmanın artmasına yol açtığını bulduk. makrofaj enfeksiyonu sırasındaTransmisyon elektron mikroskobu ile, ppx2 demonte suşu, boş vektör kontrolüne göre ilaç akış pompalarının indüksiyonu veya değiştirilmiş biyofilm oluşumu yerine hidrofilik ilaçlara azaltılmış hücre duvarı geçirgenliği ile ilişkili artan hücre duvarı kalınlığı sergiledi.Transkriptomik ve metabolomik analiz, azalan transkripsiyon ve translasyon ve gliserol-3-fosfat seviyelerinde bir düşüş ile karakterize edilen ppx2 yıkımının metabolik bir düşüşünü ortaya çıkardı.Özetle, poli(P), M. tuberculosis büyüme kısıtlamasında ve metabolik vites küçültmede önemli bir rol oynar ve değişen hücre duvarı geçirgenliği yoluyla antibiyotik toleransına katkıda bulunur. Düzenleyici moleküller inorganik polifosfat [poli(P)] ve (p) içeren katı yanıt )ppGpp'nin, Mycobacterium tuberculosis kalıcılığına aracılık ettiğine inanılmaktadır.Bu çalışmada, uzun zincirli poli(P)'nin hidrolize edilmesinden sorumlu yeni bir enzim (Rv1026, PPX2) belirledik.ppx2 geninde eksik olan genetik olarak tasarlanmış bir M. tuberculosis suşu, erken bakteri büyümesinin durması ve birinci basamak ilaç izoniazide karşı duyarlılığın azalması ve ayrıca strese maruz kalma sırasında artan bakteriyel hayatta kalma ile ilişkili artan poli(P) seviyeleri gösterdi. koşullar ve makrofajlar içinde.Kontrol suşuna göre, mutant hücre duvarında artan kalınlık ve azaltılmış ilaç geçirgenliği gösterdi.Global gen ekspresyonu ve metabolit analizi, transkripsiyonel ve translasyonel mekanizmanın azalmış ekspresyonunu ve karbon kaynağı kullanımında bir kaymayı ortaya çıkardı.Özetle, poli(P) dengesinin düzenlenmesi, M. tuberculosis'te persister oluşumu için kritik öneme sahiptir.